红棕象甲是危害椰子、椰枣等棕榈植物的重大害虫,也是我国主要的林业检疫害虫。近年来中国热科院椰子所虫害研究团队在红棕象甲寄主定位方面取得系列研究进展,为该虫的精准防控和引诱剂研发提供了技术和理论参考。
研究团队采用固相微萃取和气相色谱质谱联用对椰树组织挥发物成分进行分析,通过室内嗅觉行为实验筛选出对红棕象甲雌虫具有吸引作用的两种关键气味化合物(tt24n和t2n),借助暴露处理和荧光定量并结合RNAi技术,确定了参与这两种气味物质识别的关键气味结合蛋白(RferOBP3和RferOBP1768),并鉴定其基因功能。
研究发现RferOBP3和RferOBP1768完整的开放阅读框基因序列长度分别为402 bp、399 bp,且属于蛋白家族中的Minus-C亚族并且两者在进化树的同一四级分支上。荧光竞争结合试验发现RferOBP3同气味分子配体tt24n、t2n的结合性很强,进一步从蛋白功能上明确这两个RferOBPs与红棕象甲雌虫感知心叶特异性气味分子密切相关。
图1 暴露于两种特异性气味后红棕象甲雌虫触角中11个RferOBPs表达模式变化
图2 Rhynchophorus ferrugineus和其他鞘翅目昆虫的气味结合蛋白氨基酸序列进化树
图3 RferOBPs的三维结构图
图4 RferOBPs与气味分子间的分子对接3D、2D图
(A)RferOBP1768和tt24n. (B)RferOBP1768和t2n. (C) RferOBP3和tt24n. (D) RferOBP3和t2n.
相关成果分别以“Exploring the functional profiles of odorant binding proteins crucial for sensing key odorants in the new leaves of coconut palms in Rhynchophorus ferrugineus”(研究生袁伟钦为第一作者,吕朝军为通讯作者)发表在Int J Biol Macromol上。
研究成果得到海南省自然科学基金高层次人才项目“红棕象甲气味结合蛋白(OBPs)的基因的克隆和表达”(编号:322RC789)及国家重点研发计划项目“热带木本油料作物新品种培育及高效配套关键技术研究与示范”(编号:2023YFD2200700)支持。
相关成果链接:https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S014181302400655X
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